为了掠夺波斯首都的财宝，亚历山大大帝纵火焚毁波斯波利斯，使在大流士一世时期编成的《波斯古经》大半部分佚失。不过，对《波斯古经》的重新整理在沙普尔一世统治时期曾经进行过。
祆教是萨珊王朝的国教，但是萨珊王朝的祆教却与《波斯古经》订明的习俗有所不同。萨珊王朝的宗教政策使大量的宗教改革运动盛行，摩尼及玛兹达克的宗教运动是当中最重要的。
萨珊王朝皇帝与国家宗教措施之间的关系错综复杂而且多变，例如沙普尔一世鼓励不同的宗教共存，他本身似乎都是祖梵教的信徒，而巴赫拉姆二世则打压少数宗教。除了基督教，沙普尔二世宽容对待其他宗教，他在君士坦丁一世信奉基督教后才打压基督徒。
基督教
萨珊王朝的基督徒主要属于景教和叙利亚正教会，虽然这些教会与罗马帝国的基督教会保持紧密的关系，但他们之间的分野明显。景教和叙利亚正教会采用叙利亚语作为礼拜仪式语言，不同于拜占庭基督教的希腊语。另外，由于萨珊王朝与罗马帝国常年处于战争状态，萨珊王朝试图切断他们与罗马帝国的关联，造成了东西基督教存在差异。
伊嗣埃一世在409年承认基督教是萨珊王朝正当的宗教信仰。玛·以萨（MarIsaac）在410年被塞琉西亚与泰西封会议推选为巴比伦牧首。
以弗所公会议的决定使萨珊王朝基督教与主流基督教在431年决裂，会议谴责叙利亚出身的君士坦丁堡普世牧首聂斯脱里在教授基督论的时候拒绝称呼耶稣的母亲玛利为“上帝生母”。以弗所公会议的教义在罗马帝国得到认同，但萨珊王朝却不同意会议对聂斯脱里的谴责。聂斯脱里的牧首一职因此而被罢免，他的许多追随者逃亡到萨珊王朝。萨珊王朝皇帝借此排除支持罗马的重要神职人员，并以聂斯脱里的支持者取代他们，提升聂斯脱里在萨珊王朝教会里的地位，以确保这些基督徒忠于萨珊王朝，而不是忠于罗马帝国。
萨珊王朝的大多数基督徒分布在王朝西缘，主要是在美索不达米亚，提罗斯（Tylos，今巴林）的岛屿、波斯湾南岸、拉赫姆王国及波斯属亚美尼亚地区都散落着一些重要的基督教社群，当中一些地区很早就已经基督教化，亚美尼亚在301年便成为了第一个独立的基督教国家，而亚述地区早在三世纪就完全基督教化，但亚述人从来没有成为独立国家。
其他宗教
与祆教一起在萨珊王朝共存的宗教主要是犹太教、基督教和佛教，人们在大部分时期里都可以自由进行宗教活动及宣扬他们的宗教。萨珊王朝有相当庞大的犹太社群，主要分布在伊斯法罕、巴比伦及呼罗珊，他们在美索不达米亚还享有半自治的地位。直到锡安主义出现的时候，犹太社群依旧繁茂。对犹太人的迫害只偶然发生，相对其他宗教，犹太人享有较大的宗教自由，并得到一些特权。沙普尔一世对待犹太人特别友好，他与撒母耳的友谊为犹太人得到不少好处，他甚至向萨珊王朝的犹太人提供尼西亚白马，犹太人传说中的复国救主弥赛亚就是骑着马骡的。沙普尔二世的母亲是犹太人，沙普尔二世与巴比伦拉比拉瓦（Rava）份属好友，他们的友谊使犹太人得以从针对犹太人的高压法制当中得到喘息。另外，王朝东部多有佛教徒拜祭的地方，佛教在巴米扬等地区逐渐流行起来。
文化
萨珊王朝时期的波斯艺术，继承阿契美尼德王朝时期的传统并融合古代东方和西方的风格而有所发展。泰西封等地皇宫遗迹显示出当时建筑规模的宏伟，纳克什·伊·卢斯塔姆等地的摩崖浮雕以粗犷豪放的手法表现诸王之王的神圣尊严。精美的金银细工亦着称于世。萨珊王朝的丝织品豪华绚丽，其上绘有鸟兽、狩猎和各种植物纹样，对拜占庭、埃及和中国都有相当影响。
建筑萨珊王朝普遍流行拱顶结构的房屋，半球形的穹顶以内角拱或突角拱支撑盖在方形的房屋上。安息王朝时代已出现的拱顶桶形建筑“伊旺”，这时已广泛用于王宫建筑的入口和觐见厅。萨珊王朝的城市建筑遗迹主要有泰西封城及科斯洛埃斯二世所建的宫殿、菲鲁扎巴德城、比沙普尔等。泰西封原系安息王朝的首都，萨珊王朝时代于4世纪重建，以巍峨的王宫着称。王宫的中央是一座高约37米、拱跨约25米的拱顶大厅，四周连着带拱顶的暗楼。王宫以砖石建成。城内还残留下20座拜火寺。庙宇平面呈方形，屋顶为圆形，屋子四周为带拱顶的走廊。不少庙宇
建于岩石山峰顶上，几公里外即能看到庙前燃烧的“圣火”。各类建筑物的墙面均以带有雕刻图案的灰泥或镶嵌物作装饰。菲鲁扎巴德城址平面呈圆形，象征琐罗亚斯德教所崇拜的太阳圆盘。有三道环城城墙，外面两道城墙各有4座城门。城市中央是王宫、政府官邸、神庙和烽火塔。
建筑物都呈方形，带圆屋顶。雕刻萨珊王朝的雕刻，特别是岩石浮雕获得高度发展。绝大多数浮雕刻于王朝建立后的最初150年内。它们广泛分布于萨珊帝国各地，仅在今伊朗境内就有30处以上。浮雕的画面都是表现神授王权、战胜敌人、各民族对皇帝朝贡等事件的。其内容具有明显的颂扬王室的特征。表现形式既吸收了罗马高浮雕的手法，又创造了典型的波斯纹饰化的风格。与安息王朝时代的人物正面浮雕不同，既有正面又有侧面的形象。最着名的是附近的罗斯塔姆岩石浮雕。它采用罗马传统的高浮雕手法，表现阿尔达希尔被授予王权时的场面，皇帝和神都骑在马背上。此外，雕刻艺术还广泛见于宝石和印章上。最杰出的宝石雕刻是一块岩石结晶，上面刻画了科斯洛埃斯一世登基时的情景，今藏于巴黎国家图书馆。金属器物萨珊王朝已发现的遗物中，金属器物是一项重要的内容。